代谢学人--小鼠原代肝细胞提取之实操篇
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发布时间：1天前
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热心网友
时间：11小时前
代谢学人实战篇：小鼠原代肝细胞提取实操指南
经过前文的介绍，许多读者已经跃跃欲试，准备一试身手。小编也已万事俱备，开始着手准备原代肝细胞的提取工作。
首先回顾一下上文的基础知识：肝脏作为人体的核心代谢器官，与多种代谢疾病相关，原代肝细胞因其生物学特性的保持和研究的准确性而备受青睐。提取时需准备剪刀镊子、预热的灌流液和消化液、适龄实验鼠，以及灌流泵等工具。
原代肝细胞提取是肝脏研究的必备技能，我们将采用两步灌流法进行操作。步骤如下：
麻醉小鼠，清理并固定
打开腹腔，找到并处理肝门静脉和下腔静脉，确保操作过程中避免毛发进入腹腔
插入留置针进行灌流，使用蠕动泵控制流速
使用胶原酶消化直至肝脏变软，掌握好消化程度，避免过度或不足
剪下肝脏，过筛后用DMEM冲洗，确保细胞完整性
离心洗涤，轻柔重悬，加入FBS DMEM培养基
计数和铺板，注意细胞密度和及时换液
实验过程中，细节决定成败，需要根据实验室条件灵活调整。通过不断实践，找到最适合自己的提取方法，祝各位实验顺利，科研成果丰硕！
热心网友
时间：11小时前
代谢学人实战篇：小鼠原代肝细胞提取实操指南
经过前文的介绍，许多读者已经跃跃欲试，准备一试身手。小编也已万事俱备，开始着手准备原代肝细胞的提取工作。
首先回顾一下上文的基础知识：肝脏作为人体的核心代谢器官，与多种代谢疾病相关，原代肝细胞因其生物学特性的保持和研究的准确性而备受青睐。提取时需准备剪刀镊子、预热的灌流液和消化液、适龄实验鼠，以及灌流泵等工具。
原代肝细胞提取是肝脏研究的必备技能，我们将采用两步灌流法进行操作。步骤如下：
麻醉小鼠，清理并固定
打开腹腔，找到并处理肝门静脉和下腔静脉，确保操作过程中避免毛发进入腹腔
插入留置针进行灌流，使用蠕动泵控制流速
使用胶原酶消化直至肝脏变软，掌握好消化程度，避免过度或不足
剪下肝脏，过筛后用DMEM冲洗，确保细胞完整性
离心洗涤，轻柔重悬，加入FBS DMEM培养基
计数和铺板，注意细胞密度和及时换液
实验过程中，细节决定成败，需要根据实验室条件灵活调整。通过不断实践，找到最适合自己的提取方法，祝各位实验顺利，科研成果丰硕！
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